Analýza interakce dvou různých konvertujících bakteriofágů Staphylococcus aureus
| Autoři | |
|---|---|
| Rok publikování | 2014 |
| Druh | Článek ve sborníku |
| Konference | Genetická konference GSGM 2014 |
| Citace | |
| www | http://www.biologicals.cz/conferences/index.php |
| Klíčová slova | Staphylococcus aureus, bacteriophage, lysogenic conversion, exfoliative toxin A, enterotoxin A |
| Popis | Úvod: Bakteriofágy z čeledi Siphoviridae lyzogenizují citlivé kmeny Staphylococcus aureus, a integrací svého genomu do chromozomu bakterie modifikují nejenom genetické, ale i fenotypové vlastnosti hostitele. V této práci byl zkoumán vztah eta a sea gen-pozitivních fágů při lyzogenizaci recipientního kmene S. aureus. Kmen stafylokoka je ETA-fágem konvertován na producenta exfoliativního toxinu, jenž je původcem puchýřnatých epidermolýz, a SEA-fágem na producenta enterotoxinu, který je příčinou otrav z potravin. Cílem naší práce bylo zjistit míru vzájemného působení obou typů fágů a navrhnout novou metodu identifikace rekombinantních fágů případně vzniklých při dvojnásobné pozitivní lyzogenizaci hostitelského kmene S. aureus. Metody: Byla provedena lyzogenizace netoxinogenního kmene SAU1039 dvěma ETA-a SEA-fágy, a metodami molekulární diagnostiky (PFGE , PCR, multiplex PCR) a RPLA byla analyzována plasticita genotypových a fenotypových vlastností získaných lyzogenů. Výsledky: Bylo zjištěno, že ETA-profágy neinhibovaly integraci SEA-fágů do hostitelského chromozomu. Experimentálně připravené dvojnásobné lyzogeny kmene SAU1039 vykazovaly hyperprodukci ETA a normální produkci SEA. Byla navržena nová metoda multiplex PCR pro detekci ETA- a SEA-profágů serologických skupin B a F, a zároveň pro identifikaci rekombinantních fágů vzniklých při indukci profágů z dvojnásobných lyzogenů. Nově navrženou metodou PCR byly spolehlivě identifikovány oba typy konvertujících fágů. Závěr: V této práci byly připraveny dvojnásobně lyzogenní kultury kmene SAU1039 postupnou infekcí ETA-a SEA-fágy. U žádného lyzogenu nebyla prokázána vzájemná inhibice profágů při tvorbě toxinů. Získané výsledky základního výzkumu přispívají k objasnění vzájemného působení různých konvertujícícch fágů a jejich vlivu na vlastnosti vícenásobně lyzogenních kmenů S. aureus. Poděkování: Tato práce byla financována s pomocí Interní grantové agentury Ministerstva zdravotnictví (NT12395-5/2011) a specifického výzkumu MUNI/A/0843/2012. |
| Související projekty: |